C18色譜柱選用的基本原則:
(1)選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。
(2)選用含碳量高的柱子,增加保留值。
?。?)選用較短的柱子。
?。?)選用小顆粒度的填料。
(5)對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
C18色譜柱在日常使用過程中應(yīng)注意的事項:
?。?)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
?。?)如果儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置1根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
(3)如使用柱溫控制裝置時,應(yīng)注意在通入流動相后才能升溫。
?。?)流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經(jīng)適當(dāng)?shù)那疤幚砑斑^濾,以減少柱污染和堵塞。
(5)在更換流動相種類時,應(yīng)注意溶劑的互溶性,防止發(fā)生鹽析現(xiàn)象。
?。?)柱子的實際操作壓力應(yīng)低于填裝時的較高壓力,在高壓力一半以下。
(7)屬非極性鍵合相色譜柱,流動相的pH值應(yīng)嚴格控制在一定區(qū)間之間,以免損壞柱子。
?。?)在完成分離分析工作之后,不應(yīng)立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
?。?)如果流動相中有鹽類,首先用水充分清洗。如果是胺類添加到流動相中,要用甲醇和磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
?。?0)C18一般用甲醇作為保存溶劑,以防柱子干裂而損壞。嚴禁水或緩沖溶液長時間在色譜流路中保留。
(11)選用合適的C18保護柱,以保護分析柱免受雜質(zhì)顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內(nèi)裝填料顆粒度應(yīng)與分析柱填料的顆粒度盡量一致。